人工养殖暗纹东方鲀毒性的测定

中国水产门户网报道近期日本、台湾等地的研究者指出人工养殖河鲀会无毒或毒性降低。中科院水生生物研究所朱家明等在湖北武汉多次进行了人工养殖河鲀毒性的测定与分析。

　　１　材料

　　材料鱼为养殖2年的暗纹东方鲀，个体重量0.65～0.7kg，实验随机混合取样。对照材料鱼取自冰箱保存3年的野生暗纹东方鲀，个体重量0.65～0.7kg。首先将材料解剖，分别收集肌肉、肝脏、皮肤和未成熟的卵巢共4 个部分，捣碎后放入冰箱（－20℃）冷冻备用。

　　２　方法

　　2.1 毒素的提取方法之一

　　实验前取肌肉、肝脏、皮肤各20g冻融物，分别加入2倍体积的酸乙醇（80%乙醇含1%醋酸、pH值为4）匀浆，超声波破碎３～４min后（加冰），在10000r/min离心机上离心，20min后取出上清液，沉淀后再抽提出１次，合并上清液（其中肝脏离心后上层为黄色的油状物，下层为乳白色清液）。各取离心清液15mL，浓缩蒸发至干，加蒸馏水至5mL为毒素酸乙醇抽提液（约含0.9g组织／mL）。

　　2.2 毒素的提取方法之二

　　实验前称取肌肉、肝脏、皮肤各20g冻融物、卵巢10.5g分别加入2倍体积（v/w）0.1N乙酸，匀浆，超声4min，100℃水浴加热到沸腾再保温5min，在冷却后再用10000r/min离心机离心20min，上清液为毒素抽提液，用蒸馏水稀释放１倍的毒素抽提液注射小白鼠（每毫升含0.45～0.9g组织）。

　　2.3 毒素的测定

　　选用19～22g雄性昆明鼠为受试动物，每个浓度注射２～３只小鼠。

　　３　结果与讨论

　　3.1 结果

　　人工养殖的暗纹东方鲀用上述方法提取得到的各部分提取物的浓缩和稀释液，分别以不同浓度0.5～1mL（相当于0.45～0.9g组织）腹腔注射2～3只小白鼠后，均未表现出毒性。

　　而用同样的方法提取保存３年的野生暗纹东方鲀肝脏0.2Ml（相当于0.01g组织，其毒性约为40mu/g）和卵巢0.2mL（相当于0.01g组织，其毒性约为240mu/g）注射小白鼠后，则可在３～４min使小白鼠死亡，并表现出明显的麻痹神经毒素特性（见表1）。

　　表1　暗玟东方鲀毒素测定结果

　　材料来源　部位　注入剂量/mL　对应组织重/g　毒性（鼠单位*）/mu?g -1

　　野生河鲀　　　肝脏　　0.2　　0.02　　40.7±4.7
　　野生河鲀　　　卵巢　　0.2　　0.01　　240±66
　　野生河鲀　　　肌肉　　1.0　　0.40　　未检测出毒性

　　人工养殖河鲀　肝脏　　0.5　　0.45　　未检测出毒性
　　人工养殖河鲀　肝脏　　0.5　　0.45　　未检测出毒性
　　人工养殖河鲀　肝脏　　1.0　　0.90　　未检测出毒性
　　人工养殖河鲀　肝脏　　1.0　　0.90　　未检测出毒性

　　人工养殖河鲀　卵巢　　0.5　　0.40　　未检测出毒性
　　人工养殖河鲀　卵巢　　1.0　　0.80　　未检测出毒性

　　人工养殖河鲀　皮肤　　1.0　　0.90　　未检测出毒性
　　人工养殖河鲀　皮肤　　1.0　　0.90　　未检测出毒性

　　人工养殖河鲀　肌肉　　1.0　　0.90　　未检测出毒性
　　人工养殖河鲀　肌肉　　1.0　　0.90　　未检测出毒性

　　*为酸乙醇提取液，每个浓度注射２～３只小鼠，在30min内使20g 雄性小鼠致死的最低剂量，定义为一个鼠单位。

　　3.2　讨论

　　实验结果表明，人工养殖的河鲀身体各器官、组织均无毒素或极低毒素存在，该结果与日本齐藤、野口桥本等的研究结果相一致，也与他们1999年测定的由江苏省宜兴市水产养殖场提供的人工养殖的暗纹东方鲀的结果相吻合。因此，如配合合理的烹调和管理，人工养殖的河鲀可安全食用。

　　为什么在自然环境下生长的河鲀具有剧毒，而经人工驯养后其毒性降低甚至消失，虽然国外已有结论性的报道，但结果尚不一致，有必要更深入地研究，以便为河鲀毒素的医用解毒、人工研制及安全开发河鲀这一新品种寻找途径。
                                            采集:黄倩