GAA：pH值8.5-8.8易发生EMS

中国水产门户网报道     在近期发表的全球水产养殖联盟的双月刊杂志《Global Aquaculture Advocate》7-8月刊上，Noriaki Akazawa博士对外界宣告了其最新的研究发现——通过在位于马来半岛一家大型综合性虾场对EMS/AHPNS的研究，发现EMS（早期死亡综合症）起源于被感染的虾苗，并且能够迅速地在塘间传播。后期的数据分析和鱼缸实验表明只有当所处的环境中pH在一个特定范围时，虾才会发病。随着对PH的控制，虾的成活率会明显提高。
    据了解，Noriaki Akazawa博士是Noriaki Akazawa(Agrobest有限公司)总经理，该研究得到Mitsuru Eguchi(日本国近畿大学)和日本水产养殖国家研究所的协助。
EMS呈暴发性扩张
     Agrobest公司是位于马来西亚彭亨州一个大型综合性虾场。该场一共有461个池塘，平均每个塘0.75公顷(11.25亩)且都铺有底膜。2010年该公司生产了将近11000吨南美白对虾和500吨斑节对虾。
     在2011年1月初，Agrobest的五个池塘里出现了EMS。而这五个塘的虾苗都是在一个月前从同一个虾苗场拿来的。虾场工作人员怀疑该病与虾苗场有关，但并不是所有投放此苗场虾苗的池塘都发病。五个发病塘里的藻相都呈现一种不正常的颜色--深绿色的，近乎黑色，而且在养殖后期更为明显。研究人员认为环境因素似乎在这种疾病的发生上有一定的作用。
    在首批五个池塘发病后的一个星期内，周围邻近的虾池也相继发病，并在两个月内该病蔓延到整个虾场。发病塘的死亡率达到70%-80%，并且所有年龄和规格的虾都受到了影响。基于这种疾病从中心向四周辐射状暴发的特点，研究人员认为它可能是由一个致命的病原体引起的，但所有已知病毒的多次试验结果均为阴性。受此病情影响，Agrobest公司的虾产量急剧下降，整个马来西亚的养虾业也损失惨重。对于EMS问题的研究迅速升温。
    pH值在8.5-8.8易发生EMS
    为了进一步了解EMS，研究人员进行了以下实验。在最初的试验中，研究人员将发病池塘中处于应激状态的虾转移到装有干净池塘水的水缸中。在上午的转移过程中，虾严重应激，表现为肌肉组织不透明并静止在水缸底部。研究人员预计这组虾的死亡率会很高。
    然而，当天下午，之前奄奄一息的虾逐渐恢复了体色和活力。并且这些虾继续正常存活了一周，直到试验结束。
    在第二次试验中，研究人员将健康虾放入装有取自发病虾塘的池水的鱼缸内，这些虾未受到感染，表明虾塘水体本身是不具有传染性的。
    在第三次试验中，研究人员将来自发病塘里的刚死不久的虾与健康的虾放在同一个鱼缸里。并分为两组，第一组中把死虾放在笼子里，以便与健康虾隔离开来；第二组中将两种虾放在一起。结果第一组中健康虾未出现死亡，第二组的健康虾在一至两天内就发病并死亡。这表明病原菌可经由直接接触死虾传播。
    尽管EMS在Agrobest里大量暴发，但是仍然有池塘未受影响，这也印证了环境与EMS之间有相互关系这一假设。
    研究人员对同一个月内的约80个感染和未感染池塘的水质进行了检测，结果表明水质差异与EMS的暴发密切相关。研究人员通过在水缸中保持水质参数特定的范围来研究感染池塘里的可疑水质触发因子。这些试验成功的确认pH值是一个关键的环境触发因子。在低的pH值(约为7)，该病多次消退，而在较高的pH值(8.5到8.8)，则重复出现。
    为了进一步验证这一发现，研究人员将病虾放入装满取自丰收虾塘的水的缸中，并假定这些虾塘里的水是可以避免出现EMS的。通过实验，发现将pH维持在易出现EMS的范围内的缸，虾都有发病，而pH维持在该范围之外的缸则没有发病。
    虾体、池水、底泥均检出弧菌
    随后，日本水产研究院(NRIA)对病虾进行了病理组织学研究，结果显示病虾肝胰脏出现功能障碍，肾小管上皮细胞特征性脱落。微孢子虫在受感染动物的肝器官也成倍增加。未受感染的和试验中处于安全pH范围水缸内的虾的肝胰腺组织正常，没有发现细菌和微孢子虫。
    为了确定细菌病原体的DNA序列，Agrobest团队从病虾的肝胰脏内分离了细菌，并且将分离的菌株送到日本做进一步检测，来自近畿大学和日本水产研究院(NRIA)的研究人员使用PCR引物扩增细菌16SrDNA基因序列并测序。这些专家以相似的方式对发病池和不发病池的池水和底泥进行了PCR引物扩增细菌16SrDNA基因序列并用变性凝胶梯度电泳技术对序列进行鉴别。
    研究人员从病虾和健康虾以及发病塘和没发病塘的池水、底泥中，分离鉴定出了几种细菌，其中弧菌是最普遍的。而且其中一种分离菌株似乎与副溶血弧菌的性质一致，但目前也没足够的证据可以确定就是副溶血弧菌。在发病虾塘和没发病虾塘中的细菌分布和流行并没有什么主要差异。而这很好的支持了假设：EMS细菌虽然遍布整个农场，但只有暴露于易感EMS的环境条件下的池塘里的虾才会出现症状。
    在鱼缸实验中，病虾表现出一些异常行为，导致被健康虾摄食，尽管研究人员会投味颗粒性饲料，但嗜食同类的现象一旦开始，健康虾的死亡率就显著提高。因此研究人员认为一旦出现了发病情况，无论是用多家苗场的苗，还是把放养密度从120/平方米降低到85/平方米，或者是用加氯消毒海水并且几乎零换水，EMS仍然会在随后的生产周期中再次出现。
    在2012年，池塘管理人员将工作重心放在了调水上面，保持水质在易感染EMS范围之外。他们的努力取得了良好的结果，每塘虾的死亡率从70%-80%降到了20%-30%。但是在2012年秋季，由于批发饲料质量问题和水质稳定变差，造成了虾大面积死亡。管理人员也迅速做出了改变，产量又恢复了稳定。