迟缓爱德华氏菌和虹彩病毒混合感染引起冬棚养殖点篮子鱼死亡一例

    广东珠海市斗门区白蕉镇一冬棚点篮子鱼养殖池塘，面积6.5亩，水深1.5米，3台增氧机（见图1）。目前规格1～2两左右。
       
　　2013年12月末在原塘就有死亡，过塘后死亡量增加，用过大量的药物均无效，最多的时候一天死亡1000多尾。
       
　　2014年3月8日下午5点到现场调查，水色呈浓黄绿色，透明度15～20cm，水温22℃（春节时最高水温达到30℃），简易测试盒检测水质指标：pH值8.2，亚硝酸盐0.15mg/L，氨氮测不出。从塘中取4尾发病后濒死的点篮子鱼，发病鱼体色发黑，其中3号鱼双眼突出、出血，鳍基出血，其它鱼外观无明显异常症状（见图2）。解剖见鳃丝有少量出血点，有的鳃盖内膜出血（见图3），肝脏发黄（见图4），脾脏严重肿大（见图5）、肾脏水肿、出血（1号鱼，见图6）。分别从4尾发病鱼的肝脏和肾脏中（其中两尾还从脑和眼接种）进行细菌分离培养，并取鳃、肝脏、脾脏、肾脏、脑和眼等用95%酒精及波恩氏液固定做病毒检测及病理组织切片观察。
       
　　病毒检测结果：4尾鱼中有3尾检测出真鲷虹彩病毒（见图7）。
       
　　细菌分离结果：在28℃经24小时培养，从4尾鱼中分离出两种优势细菌（见图8）。一种细菌在4尾鱼体内都分离到，在普通营养琼脂培养皿上形成圆形、隆起、灰白色、湿润并带有光泽、呈半透明状的菌落，革兰氏染色阴性、两端钝圆、散在或个别成双排列的短杆菌（见图9），经16S rDNA测序鉴定为迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）；一种细菌只在眼睛突起、出血的3号鱼体内分离到，在普通营养琼脂培养皿上形成圆形、隆起、黄色不透明的菌落，革兰氏染色为阴性、两端钝圆、散在或个别成双排列的杆菌（见图10），经16S rDNA测序鉴定为点状产气单胞菌（Aeromonas punctata）。
       
　　组织病理切片观察显示：鳃轻微淤血，鳃小片间细胞增生（见图11），肝脏淤血，局部脂肪变性，肝细胞固缩，有坏死，细胞界限不明（见图12），脾脏大量的黑色素巨噬细胞中心（见图13），肾脏淤血，细胞有坏死（见图14）。
       
　　对两种分离菌分别进行药敏试验，结果显示，两种分离菌菌对“氟多力”、“多康素”、“鳃肤康”、“鳃皮肠利康”、“出败康”等药物敏感（见图15、图16）。（利洋水产研究所 雷燕 戚瑞荣 提供 2014.03.20）
       
　　分析：1、从取样的4尾发病鱼体内都分离到大量迟缓爱德华氏菌，从其中1尾眼睛突出、出血的病鱼体内又分离到大量的气单胞菌，从3尾鱼体内检测到真鲷虹彩病毒，因此本病例是爱德华氏菌、气单胞菌和真鲷虹彩病毒混合感染引起的死亡，而且以爱德华氏菌的危害为主。个别鱼发生致病力更强的气单胞菌感染，出现突眼、出血等症状，可能是在爱德华氏菌基础上的继发感染。
       
　　2、从3尾发病鱼体内检测到真鲷虹彩病毒，但病理组织切片上没有见到真鲷虹彩病毒特有的肿大细胞，可能与疾病的不同发展阶段有关或不同的发病鱼种类有关（我们以前在发生真鲷虹彩病毒病的美国红鱼体内也没有观察到肿大细胞）。从发病期间水温曾经升高到30℃（真鲷虹彩病毒一般适宜发病水温在25℃以上），长期慢性死亡，用各种抗菌药物治疗无效等发病特征分析，检测到的真鲷虹彩病毒在本病例中仍然有致病作用。