噬菌蛭弧菌微生物生态制剂在虾蟹养殖上的应用

中国水产门户网报道      由于我国虾蟹养殖用药品生产和使用极不规范，养殖者盲目使用抗菌药物和消毒剂，造成虾蟹产品药物残留严重超标，使得我国虾蟹产品出口在国际市场屡屡受挫折。因此，要彻底解决抗生素及其他化学药物残留对人体的危害，拓展虾蟹产品在国际市场上的出口规模，我国水生动物养殖用药品的生产和使用一是必须规范，二是要寻求抗生素及其他化学药物的替代品，力求实施无公害养殖。

      目前困扰我国虾蟹养殖业的主要病害有病毒性、细菌性和寄生虫三大疾病。其中细菌性疾病的发病率占80%以上。当前虾蟹细菌病的流行仍是限制虾蟹的主要因素。如虾蟹烂眼病、红腿病（变红症、败血症）、白黑斑病、黑鳃病、烂鳃病、褐斑病（甲壳溃疡病、黑斑病）等疾病的病原均为细菌。在这些病原性细菌中主要有嗜水气单胞菌、苏伯利气单胞菌、非霍乱弧菌、鲁氏耶尔森氏菌、点状产气单胞菌。其中嗜水气单胞菌和弧菌是主流菌群。

      近年来，我国虾蟹养殖规模逐步扩大，放养密度愈来愈大，加上养殖池塘老化和水域日益污染的影响，致使虾蟹细菌性疾病经常暴发和流行，流行区域不断蔓延扩大，给养殖业造成了极大的经济损失。因此，做好虾蟹细菌病的有效防治，提高水产品养殖的经济效益和社会效益，是目前虾蟹养殖的重要任务。

      在虾蟹养殖过程中,对于细菌病的防治，应实施预防为主，防重于治的虾蟹健康养殖模式。在养殖措施上，选择健康的种苗，优化养殖环境和辅助药物防治措施等。在选择药物时，要坚持选用安全、高效、低毒的药物。微生物生态制剂近年来在虾蟹养殖用药品中异军突起，因此微生物生态制剂在虾蟹养殖用药品中是首选药物之一。微生物生态制剂它可以有效地调节水体pH值（酸碱度），降解亚硝酸盐，维持生态平衡，改善养殖水体。调整虾蟹肠道内菌群的微生态平衡，促进新陈代谢，刺激水生物细胞免疫系统，有效地提高虾蟹的抗病能力，减少死亡率。尤其是噬菌蛭弧菌(以下简称蛭弧菌)微生物生态制剂中的蛭弧菌、噬菌体对虾蟹养殖中常见的弧菌和气单胞菌等革兰氏阴性细菌有独特的“寄生”和“裂解（杀灭）”的功能。

      这种防治措施，在虾蟹养殖生产实践中已被证明是行之有效的，即使危害较大的无特效药治疗的病毒性疾病，微生物生态制剂也是有辅助作用的,在有效抑制细菌病的同时，可以延缓病毒性疾病的暴发。因此，微生物生态制剂在虾蟹养殖中的应用值得推广。本文着重介绍微生物生态制剂之一——蛭弧菌微生物生态制剂在虾蟹养殖中的应用。

      蛭弧菌是正常微生物菌群成员之一，它经过严格的分类和鉴定，在自然生态环境中无毒、无害。蛭弧菌来源于自然生态环境还可再回归于自然生态环境。蛭弧菌可以有选择性的寄生和裂解有害细菌，它有专性、兼性厌氧菌株之分，兼性厌氧菌株在有氧或缺氧的条件下都能生长，且能发挥作用。受光照、天气变化影响较小，适应性较强，特别适合高温季节使用，不会造成水体缺氧。蛭弧菌为广盐性，海水、淡水水域均有蛭弧菌存在。

      1蛭弧菌微生物生态制剂在虾蟹养殖中的应用
      2001年中国水产科学院黄海所徐琴等[1]将将球形红假单胞菌、蛭弧菌及粘红酵母分别混合配制，得到4种微生物生态制剂混合物，将这些微生物生态制剂混合物分别加入中国对虾幼体培育水体中，研究其对中国对虾幼体生长和非特异性免疫的影响。结果表明，使用这4种微生态制剂混合物均可极显著地提高幼体变态率，存活率提高16.86％-34.22％，体长增加0.64-1.29mm；M1-P5期的体长平均增长率也高出17％-40％；酚氧化酶和超氧化物歧化酶活力也显著（P<0.05）高于对照组。其中添加浓度为2×105pfu/ml蛭弧菌和球形红假单胞菌试验组的效果最好。

      不同配伍的微生物生态制剂对中国对虾的作用效果不尽相同。添加蛭弧菌和球形红假单胞菌联合使用在各方面都表现出协同作用，显示出其联合使用的优势。

      日照黄海水产育苗场在0.1M3的水槽中，每槽放南美白对虾4000尾，投喂蛭弧菌微生物生态制剂。结果实验组虾苗变态率91.4-94.15%，成活率53.9–63.7%。而对照组变态率77%，成活率44.4%。出苗量比对照组提高10-15%。在南美白对虾苗放养1个月后，投入蛭弧菌微生物生态制剂，每天1次，连用3天，30天为一个周期。结果实验池对虾病毒病发病时间较对照池延迟10天，产量增加40%。

      中国海洋大学唐洛明在白、兰对虾养殖过程中，用蛭弧菌微生物生态制剂防治细菌病。从虾苗运输时就开始使用蛭弧菌培养液，用量比蛭弧菌培养液与水体比为1：1000暂养30天后移苗时，其成活率达到99%以上。在该校水产养殖试验基地，使用蛭弧菌培养液，三天后水质明显变清，透明度增加。

      在试用期间，白、兰对虾生长速度平均每日增加2mm左右，色泽好，活力强，无任何疾病征兆。从以上实验证明，蛭弧菌培养物可以提高育苗的成活率；有显著的防病效果；提高产量，增产率可达395.60-482.14%；改善养殖水体，无污染。

      福建漳州陈跃生﹡用蛋白营养剂500ml/亩/米，加蛭弧菌微生物生态制剂50ml/亩/米（浓度为2×105pfu/ml）泼洒虾蟹养殖水体。实验到13天时，发现虾蟹苗个体整齐、活力好、成活率高，生长速度比对照组大1/2-1/3。在虾蟹苗投喂饲料时，继续使用蛋白营养剂500ML加蛭弧菌微生物生态制剂拌料。到实验40天时，使用蛋白营养剂和蛭弧菌微生物生态制剂的试验组的虾蟹苗生长到6-8cm，对照组仅4-6cm。

      2蛭弧菌微生物生态制剂的使用方法
      2．1预防为主 防治结合 科学使用
      实施预防为主、防治结合，适时使用在虾蟹病害的防治上蛭弧菌微生物生态制剂。使用蛭弧菌微生物生态制剂，不论是浸泡、泼洒或内服，都只是起到一个“接种”的作用，即向养殖水体中或虾蟹体内输入一定数量的菌种，让其利用合适的环境，合适的营养快速繁殖逐步成为养殖环境或虾蟹体内的优势种群，通常这段时间需要3-5天。而蛭弧菌大量吞噬有害细菌，抑制或消灭有害细菌，又需要一个时间过程，尤其是当有害细菌的数量过多时，这个过程则更长。为此，我们在使用蛭弧菌蛭弧菌微生物生态制剂防治虾蟹病害时，一定要坚持预防为主、防治结合的原则，根据虾蟹发病规律和病情预测资料进行科学分析，把握时机，提前5-10天使用，使之在病害大举侵袭前就形成优势菌群，将病害控制在萌芽状态。

      2．2种群促进 优势互补 配伍使用
      ﹡陈跃生《浅谈无公害对虾养殖新模式》（待发表资料）光合细菌、芽孢杆菌在代谢过程中，具有独特的产氢、固氮、分解机物的生理特性。蛭弧菌在环境中具有独特的寄生和溶解有害细菌的生物学特性。研究证明，防治虾蟹病害时，蛭弧菌微生物生态制剂和其他微生物生态制剂配伍使用，可以有效地调节水体pH值，降解亚硝酸盐，维持生态平衡，改善养殖水体；促进新陈代谢，提高虾蟹的抗病能力，减少死亡率。

      2．2．1蛭弧菌蛭弧菌微生物生态制剂和芽孢杆菌微生物生态制剂 芽孢杆菌的作用原理，一方面在于代谢过程中耗氧，并产生相应的酶，合成色氨酸，蛋白质的分解加强；另一方面芽孢杆菌可以迅速形成菌膜，并具有生物拮抗作用。目前常用的菌株有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌。
研究表明，芽孢杆菌能产生多种消化酶，帮助动物对营养物质的消化吸收。芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶，如果胶、葡聚糖、纤维素等酶，其中很多是动物本身不具有的酶。研究发现枯草芽孢杆菌具有能分泌大量的细胞外酶如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶及卵磷脂酶。
      芽孢杆菌在动物肠道内生长繁殖，能产生多种营养物质如维生素、氨基酸、有机酸、促生长因子等，参与动物机体新陈代谢，为机体提供营养物质。

      2．2．2蛭弧菌蛭弧菌微生物生态制剂和光合细菌微生物生态制剂 光合细菌是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物,是在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。光合细菌广泛存在于地球生物圈的各处。在水产养殖中,能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等有毒物质，实现充当饵料、净化水质、预防疾病、作为饲料添加剂等功能，它的诸多特性，使其在无公害水产养殖中具有巨大的应用价值。
      光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。光合细菌的适宜水温为15—40℃,最适水温为28—36℃。它的细胞干物质中蛋白质含量高达到60%以上，其蛋白质氨基酸组成比较齐全，细胞中还含有多种维生素，尤其是B族维生素极为丰富，Vb2、叶酸、泛酸、生物素的含量也较高，同时还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等生理活性物质。因此，光合细菌具有很高的营养价值，这正是它在水产养殖中作为培水饵料及作为饲料添加成分物质基础。
      光合细菌在有光照缺氧的环境中能进行光合作用，利用光能进行光合作用。在光能进行光合作用过程中，利用光能同化二氧化碳结合，但不能产生氧气的。光合细菌细胞内只有一个光系统，光合作用的原始供氢体不是水，而是H2S（或一些有机物），这样它进行光合作用的结果是产生了H2，分解有机物，同时还能固氮生氨。光合细菌在自身的同化代谢过程中，又完成了产氢、固氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。这些独特的生理特性使它们在生态系统中的地位显得极为重要。
      在自然界淡、海水中通常每毫升含有近百个光合细菌，它们在水中光照条件下可直接利用有机酸、氨基酸、氨和醣类等有机物，并使自身得以增殖，同进净化了水体。

      2．3依据规律 对症下药 适时使用
      虾蟹发病通常有四个因素：一是环境条件的突然改变，如温度的变化、溶氧不足及水体过肥等，都会导致虾蟹发病；二是病原体因素，消毒不彻底使养殖环境带有致病菌，或周围养虾蟹的塘口发病，通过流水传染；三是种质因素，虾蟹苗种不纯，本身携带病菌，或体质瘦弱适应环境或抗病能力差；四是人为因素，饲养管理不得法，投喂饵料不足，营养太差，病害侵袭和人为的惊吓也会使虾蟹致病。
通常虾蟹一年有两个发病高峰期，一是5、6月份幼体发病高峰期；二是7、8、9月份高温发病期。因而，在使用蛭弧菌微生物生态制剂防治虾蟹病害上，一定要根据发病的原因、流行的规律及发病高峰期，抓住关键对症下药，充分发挥蛭弧。